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		<title>淋病 - 版本历史</title>
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		<title>2008年6月11日 (三) 15:23 Admin</title>
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				<updated>2008-06-11T15:23:19Z</updated>
		
		<summary type="html">&lt;p&gt;&lt;/p&gt;
&lt;p&gt;&lt;b&gt;新页面&lt;/b&gt;&lt;/p&gt;&lt;div&gt;{{template:疾病提示}}&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
疾病别名：&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
所属部位：生殖部位,皮肤&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
就诊科室：性病科,传染科&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
症状体征：淋巴结肿大尿频伴尿急和尿痛发热排尿困难及尿潴留尿失禁与遗尿血尿血红蛋白尿脓尿乳糜尿蛋白尿&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
身体检查：&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
[[淋病]]是由[[淋病]]奈瑟菌（简称淋球菌）引起的泌尿生殖系统的化脓性感染，也可侵犯眼睛、咽部、直肠和[[盆腔]]等处以及血行播散性感染，是常见的性传播疾病之一。&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
==[[淋病]]是由什么原因引起的？==&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
正常情况下尿液应该是无菌的，由于尿液不断的冲洗[[尿道]]使浸入的微生物很难在泌[[尿道]]定居，而淋球菌容易在尿路上寄生，主要是由于淋球菌有菌毛，使得淋球菌对单层柱状上皮细胞和移行上皮细胞，如前[[尿道]]，子[[宫颈]]，后[[尿道]]，膀胱粘膜敏感，极容易粘附在上述细胞之上，淋球菌在酸性尿中（pH&amp;lt;5.5）很快杀死，因而膀胱和肾脏不易被感染，而前列腺液含有精胺及锌，故可受淋球菌感染，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
[[尿道]]及[[阴道]]内的寄生菌群对淋球菌的生长有一定的抑制作用，这些菌群的存在给体内提供了一些自然抵抗力，粘膜表面存在有乳铁蛋白，铁对淋球菌的长生繁殖是必需的，如环境中铁的浓度处于低水平时，则淋球菌的生长受限，淋球菌对不同细胞敏感性不同，对前[[尿道]]粘膜的柱状上皮细胞最敏感，因而前[[尿道]]最容易被感染，后[[尿道]]及膀胱粘膜由移行上皮组成，淋球菌对其敏感性不及柱状细胞，因而被淋球菌感染的机会比前[[尿道]]差，舟状窝粘膜由复层鳞状细胞组成，而多层鳞状上皮细胞不易被淋球菌所感染，淋球菌借助菌毛，蛋白Ⅱ和IgA分解酶迅速与[[尿道]]，[[宫颈]]上皮粘合，淋球菌外膜蛋白I转至[[尿道]]的上皮细胞膜，淋球菌即被柱状上皮细胞吞蚀，然后转移至细胞外粘膜下，通过其内毒素脂多糖，补体及IgM的协同作用，在该处引起炎症反应，30小时左右开始引起粘膜的广泛水肿粘连，并有脓性分泌物出现，当排尿时，受粘连的[[尿道]]粘膜扩张，刺激局部神经引起疼痛，由于炎症反应及粘膜糜烂，脱落，形成典型的[[尿道]]脓性分泌物，由于炎症刺激[[尿道]]括约肌痉挛收缩，发生尿频，尿急，若同时有粘膜小[[血管]]破裂则出现终未血尿，细菌进入[[尿道]]腺体及隐窝后亦可由粘膜层侵入粘膜下层，阻塞腺管及窝的开口，造成局部的脓肿，在这个过程中，机体局部及全身产生抗体，机体对淋球菌的免疫表现在各个方面，宿主防御淋球菌的免疫主要依赖于IgG和IgM，而IgA也能在粘膜表面起预防感染作用，患淋球菌[[尿道]]炎的男性[[尿道]]分泌物常对感染的淋球菌的抗体反应，即为粘膜抗体反应，这些抗体除了IgA外还有IgG和IgM，血清抗体反应方面，在淋球菌感染后，血清IgG，IgM和IgA水平升高，IgA为分泌性抗体，从粘膜表面进入血液，这些抗体对血清的抗体-补体介导的杀菌作用相当重要，它们对血清敏感菌株所致的淋球菌菌血症具有保护作用，一般炎症不会扩散到全身，若用药对症，足量，局部炎症会慢慢消退，炎症消退后，坏死粘膜修复，由鳞状上皮或结缔组织代替，严重或反复的感染，结缔组织纤维化，可引起[[尿道]]狭窄，若不及时治疗，淋球菌可进入后[[尿道]]或[[宫颈]]，向上蔓延引起泌尿生殖道和附近器官的炎症，如[[尿道]]旁腺炎，[[尿道]]球腺炎，前列腺炎，精囊炎，附睾炎，[[子宫]]内膜炎等，严重者可经血行散播至全身，淋球菌还可长时间潜伏在腺组织深部，成为慢性[[淋病]]反复发作的原因，这些被感染器官炎症消退后结缔组织纤维化可引起输精管，输卵管狭窄，梗阻，继发宫外孕和男性不育，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
==[[淋病]]有哪些表现及如何诊断？==&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
必须根据接触史，临床表现及实验室检查综合分析可确定诊断，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（一）接触史：患者有婚外性行为或嫖娼史，配偶有感染史，与[[淋病]]患者（尤其家中[[淋病]]患者）共物史，新生儿母亲有[[淋病]]史，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（二）临床表现：[[淋病]]的主要症状有尿频，尿急，尿痛，[[尿道]]口流脓或[[宫颈]]口，[[阴道]]口有脓性分泌物等，或有淋菌性结膜炎，肠炎，咽炎等表现，或有播散性[[淋病]]症状，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（三）实验室检查：男性急性[[淋病]]性[[尿道]]炎涂片检查有初步诊断意义，对女性仅做参考，应进行培养，以证实淋球菌感染，有条件的地方采用基因诊断方法确诊，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
【病原学】&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
[[淋病]]的病原体是[[淋病]]双球菌，属奈瑟菌属，1879年，Neisser首次分离出[[淋病]]双球菌，所以[[淋病]]双球菌又称为奈瑟双球菌（NeisseriaGonorrhoeae），1885年Bamm在凝固血清培养基上培养淋球菌获得成功，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
淋球菌的形态与脑膜炎双球菌相似，呈园形，卵园形或肾形，常成对排列，邻近面扁平或略凹陷，大小为0.6μm×0.8μm，革兰氏染色阴性，呈粉红色，美蓝染色呈蓝色，急性期病人淋球菌常见于分泌物白细胞的细胞内，而慢性期多在白细胞外，淋球菌的抵抗力较弱，怕干燥，喜欢在潮湿，温度为35～36℃，含2.5%-5%二氧化碳环境中生长，在完全干燥的环境中只能存活1~2小时,在微湿的衣裤，毛巾，被褥中能生存18-24小时，而在50℃时仅存活5分钟，淋球菌对常用的杀菌剂抵抗力很弱，1：4000硝酸银7分钟可将其杀死，在1%的石碳酸内3分钟死亡，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
淋球菌的外膜由脂多糖，外膜蛋白及菌毛组成，且有寄生和致病作用，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
菌毛（Pili）由多肽组成，有抗原性，其终端的氨基酸排列较恒定，而中段及羧基端的氨基酸排列顺序常发生改变而决定不同菌株的菌毛的抗原多样性，菌毛与淋球菌的粘附性有关，同时也有抑制白细胞吞噬的作用，培养20小时的菌落，其细胞表面具有菌毛，具有传染性，菌落衰老时菌毛亦消失，接种[[尿道]]不产生[[尿道]]炎，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
淋球菌的外膜蛋白至少有三种，其中蛋白I为主蛋白，占外膜蛋白的60%，不同淋球菌的蛋白I的抗原性不同，该抗原性质稳定，故可以以此制成单克隆抗体对淋球菌进行血清学分型，它以两种形式表达即PIA和PIB，它可在细胞膜上形成孔道，使水溶性物质，其他对细菌代谢有重要作用的物质及某些抗生素可通过细胞膜进入细胞内，蛋白Ⅱ与淋球菌同人类上皮细胞，白细胞的粘合及细胞间的粘合有关，具有热修饰性，蛋白Ⅲ具有还原修饰性，又称Rmp，有强免疫原性，与同种其他奈瑟氏菌有交叉反应，能阻断其他抗体的杀菌作用，近年还发现有铁调节性蛋白称Frp，在缺铁时表达铁的受体，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
脂多糖为淋球菌重要的表面结构之一，为淋菌的内毒素，与粘膜下和体内补体协同引起炎症反应，与淋球菌的毒力，致病性和免疫性有关，现已鉴定6种抗原性不同的淋球菌脂多糖，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
【临床表现】&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
淋球菌感染引起的临床表现取决于感染的程度，机体的敏感性，细菌的毒力，感染部位及感染时间的长短，同时和身体的健康状况，性生活是否过度，酗酒有关，根据临床表现，[[淋病]]可分为无合并症[[淋病]]与有合并症[[淋病]]；无症状与有症状[[淋病]]；播散性[[淋病]]及急性与慢性[[淋病]]等，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
一，无合并症[[淋病]]&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（一）男性无合并症[[淋病]]&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
急性淋菌性[[尿道]]炎（急性[[淋病]]）：潜伏期为1-14天，常为2-5天，初起，为急性前[[尿道]]炎，[[尿道]]口红肿，发痒及轻微刺痛，继而有稀薄粘液流出，引起排尿不适，约2天后，分泌物变得粘稠，[[尿道]]口溢脓，脓液呈深黄色或黄绿色，同时伴有[[尿道]]不适症状加重，红肿发展到整个阴茎龟头及部分[[尿道]]，出现尿频，尿急，尿痛，排尿困难，行动不便，夜间阴茎常有痛性勃起，可有腹股沟淋巴结肿大，红肿疼痛，亦可化脓，急性症状第一周最严重，若不治疗，持续一月左右症状逐渐减轻或消失，急性前[[尿道]]炎发病2周后，约有50-70%的患者有淋球菌侵犯后[[尿道]]，表现为尿意窘迫，尿频，急性尿潴留，尿痛特点是排尿终未时疼痛或疼痛加剧，呈针刺样，有时出现[[会阴]]坠痛，可出现终未血尿，病情经过1-2周&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
==[[淋病]]应该做哪些检查？==&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
实验室检查：&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
淋球菌实验室检查包括涂片，培养检查淋球菌，抗原检测，药敏试验及PPNG测定，基因诊断，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（一）涂片检查：&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
取患者[[尿道]]分泌物或[[宫颈]]分泌物，作革兰氏染色，在多形核白细胞内找到革兰氏阴性&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
双球菌，涂片对有大量脓性分泌物的单纯淋菌性前[[尿道]]炎患者，此法阳性率在90%左右，可以初步诊断，女性[[宫颈]]分泌物中杂菌多，敏感性和特异性较差，阳性率仅为50-60%，且有假阳性，因此世界卫生组织推荐用培养法检查女病人，慢性[[淋病]]由于分泌物中淋球菌较少，阳性率低，因此要取前列腺按摩液，以提高检出率，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
咽部涂片发现革兰氏阴性双球菌不能诊断[[淋病]]，因为其他奈瑟菌属在咽部是正常的菌群，另外对症状不典型的涂片阳性应作进一步检查，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（二）培养检查：&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
淋球菌培养是诊断的重要佐证，培养法对症状很轻或无症状的男性，女性病人都是较敏感的方法，只要培养阳性就可确诊，在基因诊断问世以前，培养是世界卫生组织推荐的筛选[[淋病]]的唯一方法，目前国外推荐选择培养基有改良的Thayer-Martin（TM）培养基和NewYorkCity（NYC）培养基，国内采用巧克力琼脂或血琼脂培养基，均含有抗生素，可选择地抑制许多其他细菌生长，在36℃，70%湿度，含5%-10%CO2（烛缸）环境中培养，24-48小时观察结果，培养后还需进行菌落形态，革兰氏染色，氧化酶试验和糖发酵试验等鉴定，培养阳性率男性80%-95%，女性80-90%，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（三）抗原检测&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
1．固相酶免疫试验（EIA）：可用来检测临床标本中的淋球菌抗原，在流行率很高的地区而又不能作培养或标本需长时间远送时使用，可以在妇女人群中用来诊断淋球菌感染，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
2．直接免疫荧光试验：通过检测淋球菌外膜蛋白I的单克隆抗体作直接免&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
疫荧光试验，但目前在男女二性标本的敏感不高，特异性差，加之实验人员的判断水平，故该实验尚不能推荐用来诊断淋球菌感染，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（四）基因诊断&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
1．淋球菌的基因探针诊断&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
淋球菌的基因探针诊断，所用的探针有：质粒DNA探针，染色体基因探针和rRNA基因探针，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（1）质粒DNA探针&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
①隐蔽质粒DNA探针，淋球菌质粒分为三种：接合性质粒，分子最大，为36kbDNA；耐药性质粒包括两个质粒，DNA长分别为5.6kb和7.1kb；隐蔽质粒4.2kb，其中隐蔽质粒存在于96%的临床淋球菌分离株中，其它奈瑟菌不含有此质粒，故可用它的序列作为特异DNA探针检测淋球菌，Torres采用核酸杂交技术检测淋球菌，所用探针为隐蔽质粒，用该探针对134株淋球菌和131株相关菌株的检测，有124株淋球菌杂交反应阳性，占93%，还可与个别其它的奈瑟菌出现交叉反应，对测定探针的敏感性实验表明可检出102CFU淋球菌，研究证明隐蔽质粒中CPPB基因序列在所有的淋球菌染色体中（包括不含该质粒的菌株），因此CPPB基因探针具有良好的特异性和敏感性，Torres等用CPPB基因探针检测了201份临床标本，采用非放射性地高辛标记系统，其敏感性和特异性分别为95%和98%，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
②耐药性质粒DNA探针&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
淋球菌的抗药质粒可分为：①产青毒素酶淋球菌（PPNG）其β-内酰胺酶阳性；②具有高水平的质粒介导的耐四环素淋球菌（TRNG），&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
PPNG菌株是1976年首次在实验室分离得到的，该菌中含有编码产青毒酶的基因，该基因既可整合于染色体上也可出现在质粒DNA中，而后者居多，称之为产青毒素酶质粒，质粒有二种，大小分别为7.4kb和5.3kb，Pescador1998年设计一特异的检测淋球菌编码β-内酰胺酶基因的探针，采用酶化学发光法标记，液相杂交，用测光计测是特异杂交体的光量，在4h内可检测104-105CFU的PPNG菌株，TRNG菌株虽对四环素耐药，但通常对β-内酰胺酶类及喹诺酮类抗菌素敏感，因此，在实验室药敏检测中可归为敏感细菌，Pescador用抗四环素淋球菌(TRNG)tetm基因的寡核苷酸探针,该基因介导抗四环素,用酶化学发光标记,液相杂交,4h内可直接从临床标本中检出含有tetm基因的1.5×104CFu的淋球菌，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
(2)染色体探针&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
染色体探针包括已知功能的基因探针，如菌毛DNA探针和paI基因探针，这些基因在淋球菌感染人细胞的过程中起着重要作用；未知功能的基因探针，这些探针序列与染色体的特定序列互补，但目前还不知这些基因序列的功能，以上两种染色体探针由于在淋球菌中互补序列的拷贝数较低，检测灵敏度较低，因此一般用的不多，除非有特殊的研究目的，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（3）rRNA基因探针&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
rRNA基因探针是将与rRNA互补的DNA作为探针，该探针的靶序列是rRNA序列，rRNA的基因探针的特点是：①可以增加探针检测的灵敏度，rRNA基因探针可同时检测rRNA分子和DNA分子；②rRNA具有进化上的保守性；③杂交方法简便，快速；④由于rRNA的含量较高，标本不需增菌，美国Gen-Probe公司生产的淋球菌检测探针PACEC，是以rRNA及其基因为检测靶序列，采用放射性标记，在2h内可以完成检测，Peter用这种探针检测395个临床标本，结果灵敏度和特异性分别为92.9%，99.4%，他认为PACEC系统筛查临床标本中淋球菌是一个可靠的方法，该探针还可以检测无症状淋球菌感染者，这是目前培养难于达到的，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
2，淋球菌的基因扩增检测&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
上面讲述的探针技术检测淋球菌的方法，虽然比培养方法在灵敏度，特异性和方便性上有了很大的提高，但其仍有一定的局限性，如多数情况下需要标本的淋球菌浓度很高，PCR技术和连接酶链反应的出现进一步提高了检测淋球菌的灵敏性，它具有快速，灵敏，特异，简便的优点，可以直接检测临床标本中极微量的病原体，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（1）淋球菌DNA的提取&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
①培养菌的DNA提取&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
将培养得到的淋球菌，以102cfu/ml的浓度溶于碱性裂解液中裂解，裂解液组成为：1MNaCl1MNaOH和1%Sodiumdodecylsulphate，将裂解液混匀后煮沸1min，然后用100μl的1MTrispH7.0中和碱性裂解液，用Tris平衡酚提抽一次，酚—氯仿抽提一次，然后用无水乙醇或异丙醇沉淀DNA，提取的DNA溶于30μl蒸馏水或TE缓冲液中，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
②临床棉拭子标本的提取&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
将贴有分泌物的棉拭子在2ml的无菌生理盐水中或PBS缓冲液中挤压洗1min，以便将标本尽量溶于溶液中，将棉拭子弃去，悬浮液于2-3000r/min离心5min，吸去上清液，细胞重新溶于100μl1×PCR缓冲液，其中含Tween200.45%,蛋白酶K200μg/ml，细胞悬浮液于50-60℃温浴1h,然后95℃加热10min以灭活蛋白酶K,12000r/min离心10min,上清液含DNA模板，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（2）PCR引物的设计&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
由于淋球菌隐蔽质粒CPPB基因在淋球菌染色体中和4.2kb隐蔽质粒中都有存在，同时在96%的淋球菌中都有该隐蔽质粒，因此很多PCR引物设计在CPPB基因区，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
靶基因引物序列片段长度（bp）&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
CPPBNG15′GTTTGGCTGGTTGATTCAAG3′633&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
NG25′GCAAGATTTCCGATTTGGCG3′&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
CPPBHO15′GCTACGCATACCCGCGTTGC3′390&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
HO25′CGAAGACCTTCGAGCAGACA3′&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
rRNA引物15′-AGGCTGTTGCCAATATCGGC-3′206&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
引物25′-ACACTCGAGTCACCCAGTTC-3′&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
CPPBGC15′CTTATCGTTTGGCTGGTTGATTC3′435&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
GC25′ACCAAGACCAAAGGTTTGACACTG3′&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
GC35′ATTTTCCAGTGTCAAAC3′241&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
GC45′TATTCAAGCCCTATCTG3′&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（3）PCR扩增&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
取淋球菌DNA提取液2μl，加入28μl的反应液中，最终PCR反应液中含dNTP各100μmol/L，引物各0.5μmol/L，TaqDNA聚合酶1U，Mg2+1.5mmol/L,加无菌石蜡油30μl，1000r/min离心30s，进行PCR扩增循环，反应条件：94℃变性1min，然后94℃30s，57℃1min，72℃1min，共30个循环，最后72℃延伸5min，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
扩增产物于2%的琼脂糖凝胶电泳30min，溴化乙锭染色，紫外灯下可见扩增的DNA荧光条带，分子大小应与所用引物扩增靶序列的大小一致，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（4）PCR的灵敏性和特异性&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
由于CPPB在不含有隐蔽质粒的淋球菌染色体上也会含有CPPB基因，再加96%的淋球菌都会有隐蔽质粒，因此用CPPB作为靶序列的引物具有极高的敏灵性，实验证明，一般传统一步PCR（GC1-GC2）方法可以检出3个淋球菌，而用单管巢式PCR（GC2-GC4）可以检出≤0.3淋球菌（9个CPPB基因），这些引物经特异性实验，只能扩增淋球菌的DNA，而对非淋球菌奈瑟氏菌扩增不出特异产物，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（5）单管巢式PCR方法&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
是在传统巢式PCR的基础上将两对PCR引物作特殊的设计，巢式外侧两个引物（GC1，GC2）为25b退火温度比较高（68℃），巢式内侧两个引物GC3-GC4为17b退火温度较低（46℃），PCR反应液的其它成分与一般PCR相同，这样，通过控制退火温度（68℃）使外侧引物先行扩增，经过20-30次循环后（第一次PCR），再降低退火温度（46℃）使内侧引物以第一次PCR产物为模板进行巢式扩增，该PCR的灵敏度可达到检出0.3个淋球菌，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（6）淋球菌连接酶链反应（LCP）检测方法&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
目前PCR检测淋球菌的方法被广泛地使用，其特异性，灵敏性不断提高，同时另一种基因诊断技术——连接酶链反应（LCP）也以其高特异，高灵敏性被应用于淋球菌的检测中，LCP与PCR不同之处在于LCP用四对引物，所用酶是连接酶，连接酶可以将两条相邻引物连接起来，连接起来的两条引物可以作为另两条引物的模板，后者在连接酶作用下连接，又可作为模板，如此进行30-40次循环，LCP所用的模板处理方法与PCR模板制备相等，LCP所用的探针除了可以设计在CPPB基因上，也可以设计在染色体基因序列上，例如opa-1基因，美国Abbott实验室在opa-1基因的48bp长的区域内设计了4个LCP探针，由于opa-1基因在淋球菌的染色体中有11次重复，因此，该组LCP探针具有高灵敏性和特异性，LCP反应过程：&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
将模板加入LCP反应液中，LCP反应液：20mmol/LTris-HClpH7.6;100mmol/LKCl10mmol/LMgCl2；1mmol/LEDTA;10mmol/LNAD+;10mmol/LDTT,有标记物的两个相邻探针各40fmol/L，未标记的探针各40fmol/L，15U耐热连接酶，反应条件：97℃1s，55℃1s，62℃50s，其40循环，100μl反应产物加入酶标板微孔中，进行显色反应，最后用酶标仪读取光值，根据Buimer的实验证明，LCP在检测男性[[尿道]]棉拭子标本的灵敏度为100%，尿液标本为88.9%，女性[[宫颈]]棉拭子标本为95.4%，LCP方法的特异性高达100%，这一点明显高于PCR的特异性，避免了假阳性的发生，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
3．临床基因诊断淋球菌的注意事项&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
目前临床检测淋球菌的基因诊断方法主要采用PCR方法，但是该方法在临床检测中应注意几个问题，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（1）引物设计除了以上所列的淋球菌PCR引物外，还可从在其它基因上设计，但&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
是引物序列应具有特异性，因为细菌的染色体较大，许多基因序列并没有搞清楚；同时细菌之间或近或远有一定的同源性，而且细菌所含质粒序列间也存在同源性，因此设计引物一定要进行基因数据库比较分析，同时进行特异性和灵敏性实验，从中选择引物进行临床检测，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（2）临床标本处理对临床标本来讲，PCR模板要求越纯越好，这就要求在采集标本时要取到准确的位置，对于无症状患者要适当多采样，以保证采集到病原体细菌，另外由于临床标本成分比较复杂，有时简单处理的标本PCR扩增效果并不理想，这可能是由于杂质过多造成的,需要进一步纯化，如用酚一氯仿抽提法纯化，结果将会好转，这种纯化方法比较麻烦,目前已有商品化的DNA纯化试剂盒,可以较简便地从临床标本中提取高纯度的DNA，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（3）PCR产物的检测方法不久以前临床PCR检测淋球菌几乎都采用电泳的方法进行PCR产物的鉴定，该方法存在许多问题，如由于肉眼观察的主观性而造成假阳性和假阴性的结果，目前用杂交显色法代替电泳法，提高了结果判断的特异性和灵敏性，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
总之，PCR方法与LCP方法比传统的培养法在灵敏性和特异性上有了很大的提高，时间也大大缩短，随着基因诊断技术的不断改进，PCR方法与LCP方法在淋球菌的检测将会成为常规的检测方法，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（五）药敏试验：在培养阳性后进一步作药敏试验，用纸片扩散法做敏感试验，或用琼脂平皿稀释法测定最小抑菌浓度（MIC），用以指导选用抗生素，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（六）PPNG检测：β-内酰胺酶，用纸片酸度定量法，使用WhatmanI号滤纸PP-NG&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
菌株能使其颜色由蓝变黄，阳性为PPNG，阴性为N-PPNG，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
==[[淋病]]应该如何治疗？==&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
[[淋病]]是一种极容易传染和重复感染的性病，常常合并衣原体等感染，淋球菌容易出现耐药性，易出现合并症及后遗症，在治疗上应引起足够重视，自从1935年应用磺胺药治疗[[淋病]]，1944年使用青霉素治疗[[淋病]]，均取得了较好的疗效，随着耐青霉素和耐四环素及其他耐药菌株的出现，给[[淋病]]治疗带来了困难，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
一，治疗原则：&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（一）早期诊断，早期治疗；（二）及时，足量，规则的用药；（三）针对不同的病情采用不同的治疗方法；（四）对性伙伴追踪，同时治疗；（五）治疗后随诊复查；（六）注意同时有无衣原体，支原体感染及其他STDs感染，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
二，治疗方案：&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（一）淋菌性[[尿道]]炎和[[宫颈]]炎：普鲁卡因青霉素Ｇ，480万单位加入100毫升生理盐水静滴；或氨苄青霉素4.0g一次口服也可用针剂静滴；或羟氨苄青霉素4.0g顿服，上述三种药物任选一种，对青霉素过敏者，可用四环素0.5g/次，每6小时一次，共服7日；红霉素类如利君沙，阿齐霉素，罗红霉素等按说明服用，共服7日，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
对产生青霉素酶的淋球菌（PPNG），即对青霉素耐药的淋球菌，当耐青霉素淋球菌流行率达到5%以上时使用青霉素应加舒巴坦钠，另外可选用其它药物；&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
1．头孢菌素类，头孢三嗪3.0g静滴，头孢噻肟钠4.0g静滴，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
2．状观霉素，亦称淋必治，2g一次肌肉注射，亦有人主张女性用4g一次肌肉注射，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
3．喹诺酮类药物：氟嗪酸，又叫泰利必妥600mg，一次口服，氧氟沙星，200mg静滴，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
注：喹诺酮类药物孕妇与儿童禁用，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
4．β-内酰胺酶抑制剂和青霉素类药合剂，优立新为青霉素烷砜和氨苄青霉素合剂，1.5g一次肌肉注射,特灭菌为哌拉西林钠加舒巴坦钠,3.0g一次肌肉注射或静滴，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
由于[[淋病]]患者中有部分同时合并衣原体感染，我们在治疗中常用头孢曲松钠3.0g静滴,口服阿齐霉素,或罗红霉素250mg,每日两次，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（二）淋菌性咽炎：头孢曲松钠3.0g静滴；或氧氟沙星250mg口服，一日三次，或复方新诺明1g/次，一日两次，共7日，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（三）淋菌性直肠炎：头孢曲松钠3.0g静滴，或乐施福定3.0g静滴，或治菌必妥3.0g静滴，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（四）淋菌性眼炎成人，水剂青霉素G1000万单位[[静脉]]滴注，每日一次，共5日，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（五）儿童[[淋病]]体重≥45kg者按成人剂量给药，体重&amp;lt;45kg的儿童按以下方法给药：头孢曲松钠125mg，一次肌肉注射；或乐施福定25mg/kg，一次肌肉注射；或壮观霉素40mg/kg，一次肌肉注射，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（六）有合并症[[淋病]]&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
①[[淋病]]合并输卵管和附睾炎，水剂普鲁卡因青霉素G480万，静滴，一日两次，共7天，PPNG引起者，特灭菌3.0g，一日一次，共7次，壮观霉素2g，肌肉注射每日一次，共10日，或头孢曲松钠，治菌必妥，乐施福定任何一种3.0g静滴，一日一次，共7日，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
②播散性[[淋病]]：水剂青霉素G1000万单位[[静脉]]滴注，每日一次，共7日，亦可用头孢曲松钠3.0g[[静脉]]注射，每日一次，共7日，&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
[[Category:性愛私語]][[Category:疾病]][[Category:性病]]&lt;/div&gt;</summary>
		<author><name>Admin</name></author>	</entry>

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